生物工程外文翻译--粉螨中肠pH的测定(译文)生物工程外文翻译--粉螨中肠pH的测定(译文)

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中文5200字出处JournalofInsectScience,2010,10142PDF外文http//www.luanucci.com/p137003.htmlDeterminationofpHinregionsofthemidgutsofacarididmites粉螨中肠pH的测定摘要螨类中肠的pH值强烈影响着他们的消化过程。这个研究确定了12种仓储螨的房屋尘螨的中肠pH值。在螨类喂食试验中选用了18种指示剂?;谥甘炯恋难丈浠?,螨类的中肠内容物pH值范围确定为47之间。中肠内部pH从前部到后部呈现梯度变化。大部分物种的中肠前部(前胃和盲肠)pH变化4.55之间,有些物种呈现弱碱性,而中肠中部(中部结肠)pH56。中肠后部(后结肠)的pH在5.57之间。在测试螨类中除了粉尘螨外其他螨中肠pH没有显著地差异。尘螨的中肠酸性更强,前部(pH45),结肠(pH5后部结肠(pH低于6)。在螨中肠的体内条件获得的结果为螨消化酶活性包括他们的抑制剂和中肠微生物群落的研究提供了有力的帮助。前言生态上的螨是重要的害虫,他们的中肠的pH值会很大程度影响杀螨作用、病原体感染的成功率、消化过程。研究害虫消化酶活性剂中肠微生物群丛的首先必须是鉴定中肠pH值Skibbeetal.1996Terraetal.1996Funkeetal.2008。虽然已有部分确定中肠pH值的研究,但是确定生态螨的消化范围的pH值的研究还很少?;旧?,比色法、电位测定法、和电导分析法是常用的确定pH值得方法Carsky1981。微电极是昆虫中确定pH最常用的工具Bruneetal.1995Harrison2001ZimmerandBrune2005Grossetal.2008,但由于螨虫体型极小无法使用。Skibbeetal.1996提出核磁共振成像作为确定昆虫中肠pH的可选用的方法,而此方法不常用。pH比色法利用加酸显色化学试剂作为指示剂。酸碱指示剂颜色根据pH的改变而改变成是由奥斯瓦尔德提出的理论,后由汉奇提出互变异构的概念人类的眼睛能够预计的颜色变化的浓度比率是101110,改变范围约是pHpKAHIn±1,pKAHIn是指示剂的解离常数。根据奥斯瓦尔德理论,pH指示剂是弱酸或者弱碱,pH接近值是滴定指数pT。颜色的改变时由于H离子的激活导致指示剂的解离和非解离形式。指示剂在特定pH值下不会急剧的改变,但会在一个小范围的pH值内改变。指示剂在这个范围内的某个pH值显示中间体的颜色。BrdickaandDvorak1977DvorakandKoryta1983HolzbecherandChuracek1987.虽然利用pH指示剂获得结果与电势测定的结果一致EspinozaFuentesandTerra1987Boudkoetal.2001,但是电势测定的结果比指示剂方法更精确。由于螨类体型极小,测定消化道范围pH唯一可用的方法是指示剂法。由于螨类身体极小且透明可使用染色法并利用化学染色剂直接测定定中肠的pH值。这个方法曾用几个pH指示剂如石蕊、酚红、通用指示剂、中性红确定中肠的生理pHHughes1950AkimovandBarabanova1976,1978Akimov1985。这是利用18种指示剂基于染色法首次对仓储螨及尘螨中肠pH的研究。材料和方法测试的12种螨,包括5种粉螨(粗足粉螨、椭圆板白螨、SancassaniarodionoviZachvatkin、syn.CaloglyphusredickorzeviZachvatkinandCaloglyphushughesiSamsinak、腐食酪螨、线嗜酪螨、)果螨(甜果螨)、嗜渣螨(拱殖嗜渣螨)尘螨(粉尘螨、户尘螨)食甜螨科(家食甜螨,和A?roglyphusrobustus)。这些螨类在捷克布拉格水稻研究学会实验室饲养(详细的饲养条件见Erban和Hubert,2008)。指示剂的应用和螨类显微镜观察的制备指示剂的选择是基于他们的pT和/或pKA值及变色范围HolzbecherandChuracek1987,Senese2000,ShevchenkoandKulichenko2005,Sabnis2008。所有的指示剂都购于SigmaAldrich。所有的指示剂分为6组(1)确定pH38的指示剂酚酞pKA9.1,9.4,9.53,9.70pT8.49.4transitionrange8.310.0、百里酚蓝pKA1.658.90pT2.6and8.4transitionrange1.22.8and8.09.2(2)确定pH制接近7的指示剂石蕊pKA7.00pTNFnotfoundtransitionrange5.08.0、苯酚红pKA7.9pT7.0transitionrange6.88.2、亮黄pKANFpTNFtransitionrange6.58.0、溴百里酚蓝pKA7.0,7.1pT6.4transitionrange6.07.6(3)确定中肠碱性限值的是溴苯酚红pKA6.51pT6.16transitionrange5.26.8和氯酚红pKA6.00pT6.00transitionrange4.86.4(4)确定中肠pH低(酸)限的是溴苯酚蓝pKA4.0,3.85,3.6pT4.0transitionrange3.04.6、茜草色素pKA4.5pTNFtransitionrange3.56.5、甲基橙pKA3.76,3.40pT4.0transitionrange3.04.4、刚果红pKA4.1pTNFtransitionrange3.05.0(5)在酸性限制级碱性限制范围内进一步精确确定pH的是甲基红pKA5.06,2.3,2.5,4.95pT4.80transitionrange4.46.2、刃天青pKA6.71pTNFtransitionrange3.86.5、溴甲酚绿pKA4.7,4.6pT4.66transitionrange3.85.4(6)通用酸碱指示剂(UABI)UABI310transitionrange3.010.0、UABI05、UABI410transitionrange4.010.0。将指示剂溶解在水或水乙醇溶液中,混入小麦中获得终浓度2(wt/wt)的指示剂。利用振荡器混匀湿的富含指示剂的饲料,然后置于密封的玻璃管中冻干HetoPowerDryLL3000,ThermoFisherScientific,www.thermo.com。每个1.5ml离心管中放入约5mg粉末,加入至少50个样本。每个管中加入一张湿滤纸。间隔24,48,72小时螨被转移到玻璃有盖培养皿。在螨分散后,在解剖显微镜下用毛笔收集摄取指示剂的样本。在用光学显微镜观察前用生理盐水(0.9Nacl)洗涤螨外部的饲料碎渣。螨中肠的显微观察在Axioskop复合显微镜利用Axiovison软件和powershotA620数码相机下观察中肠颜色的变化。每个最小的方案每个物种每种指示剂包括10个阳性观察。不同于组织学研究,中结肠不能够在观察中被识别出来。此研究中,除了中结肠外,确定了前胃、盲肠、结肠和后结肠的颜色变化(纤细的肠道解剖图,见图1)。染料颜色的在肠道内腔的变化进行考虑,省略食物和粪便沸腾物(获得高浓度指示剂)。为了产生颜色对照,颜色指示剂溶解于BrittonRobinson缓冲液I。这个过程精细到0.1pH单位,颜色的改变与显微镜观察的颜色的改变进行比较。结果未喂食指示剂食物的螨类的身体是透明的。摄取指示剂的螨中肠颜色改变。(表1)确定pH38之间的指示剂酚酞始终是无色的,与没有指示剂的观察结果一样。百里酚蓝始终是黄色的,没有例外的。确定pH值接近7的指示剂除了红色石蕊和苯酚红染色的红色后结肠外,在所有案例中指示剂显示出黄色。颜色变化证实中肠的pH大部分低于6.5。在所以物种试验中苯酚红在后结肠的染色具有种间不同。证明在一些螨类中后结肠的pH约7。确定中肠PH碱性限制的指示剂这组指示剂的pH范围的上限是6.0。中文指示剂的共同显示了所有测试螨类的盲肠和前胃PH低于6。在结肠和后结肠,被观察到为红色,从结肠到后结肠红色显著增加。只有尘螨和A.robustus显示整个颜色都是黄色。确定中肠酸限的指示剂基本上,指示剂颜色的改变证实在mesodeal腔的pH高于4。盲肠、前胃、结肠被溴苯酚蓝染成蓝色。然而,在表皮尘螨属中两种螨中不同,被染成黄色和绿色。在样本T.lini中,在前胃和盲肠中被染成绿/蓝色。甲基橙和刚果红(图2A)在所有测试物种中的所有mesodeal隔室中产生相同的颜色。在整个中肠中甲基红产生黄色,刚果红产生红色。茜素红S产生红或者黄色染色的中肠,与其他染色剂不一致。在酸或碱限制内确定pH更为精确的指示剂甲基红为红色时证实pH低于5,为黄色时pH高于5.甲基红为红色时证实pH低于5,为黄色时pH高于5.被甲基红染成红色的盲肠的胃被证实pH低于5。另一方面,结肠为黄色,说明pH高于5?;粕暮蠼岢χっ鱬H高于6。这是基于甲基红的变色范围(4.46.2)且PH低于6.2时不会出现黄色的基础上。甲基红很好的说明了整个中肠从中间酸性盲肠、前胃到中性的后结肠的pH梯度。在这些范围内,刃天青的颜色从橙色到紫罗兰变化?;?/div>
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粉螨 pH 中肠
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